咨詢熱線
17621170138
17621170138
詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現貨 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
維生素B6測試盒
微量法100T/96S
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
維生素B6（Vitamin B6）又稱吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在體內以磷酸酯的形式存在，是一種水溶性維生素，在細胞中參與多種蛋白質和氨基酸的代謝，對生物體具有極其重要的作用。
測定原理
VB6與4-氨基安替比林在強氧化劑作用下生成穩定的黃色化合物，在390nm有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液：液體70mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體1mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體5mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體8mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體8mL×1瓶，4℃避光保存。
樣本處理
組織：將樣品磨碎，按照質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入0.6mL提取液）加入提取液，60℃浸提30min，加蒸餾水0.4mL，混勻后于25℃，16000rpm離心10min，取上清測定（動物組織等蛋白含量較高的樣本建議離心20-30分鐘）。
細胞：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入0.6mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；加蒸餾水0.4mL，混勻后于25℃，16000rpm離心10min，取上清測定。
血清：直接測定。
測定操作
空白管 | 測定管 | |
樣品（μL） | 40 | |
試劑一（μL） | 40 | |
試劑二（μL） | 40 | 40 |
試劑三（μL） | 60 | 60 |
試劑四（μL） | 60 | 60 |
充分混勻，25℃反應20min，于微量石英比色皿/96孔板，測定390nm處吸光值，記為A空白管和A測定管，△A=A測定管-A空白管?？瞻坠苤灰鲆还堋?/p> | ||
計算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.3635x+0.0205，R2 = 0.9986
1. 按照蛋白含量計算
VB6含量（μg/mg prot）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷（V樣×Cpr）
= 13.76×（△A - 0.0205）÷ Cpr
2. 按照樣本質量計算
VB6含量（μg/g）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷（V樣×W÷V樣總）
= 13.76×（△A - 0.0205）÷ W
3. 按照細胞數量計算
VB6含量（μg/104 cell）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷（V樣×細胞數量÷V樣總）
= 13.76×（△A - 0.0205）÷ 細胞數量
4. 按照液體體積計算
VB6含量（μg/mL）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷V樣
= 13.76×（△A - 0.0205）
V反總：反應總體積，0.2mL；：V樣：加入樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，1mL； Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g
b．用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.1818x+0.0205，R2 = 0.9986
1. 按照蛋白含量計算
VB6含量（μg/mg prot）=（△A - 0.0205）÷ 0.1818×V反總÷（V樣×Cpr）
= 27.52×（△A - 0.0205）÷ Cpr
2. 按照樣本質量計算
VB6含量（μg/g）=（△A - 0.0205）÷ 0.1818 ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）
= 27.52×（△A - 0.0205）÷ W
3. 按照細胞數量計算
VB6含量（μg/104 cell）=（△A - 0.0205）÷ 0.1818×V反總÷（V樣×細胞數量÷V樣總）
= 27.52×（△A - 0.0205）÷ 細胞數量
4. 按照液體體積計算
VB6含量（μg/mL）=（△A - 0.0205）÷ 0.1818×V反總÷V樣
=27.52×（△A - 0.0205）
V反總：反應總體積，0.2mL；：V樣：加入樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，1mL； Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g
注意事項
若測定結果中吸光值超過1，請將樣本稀釋后進行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數。
蛋白濃度較高的樣品，比如動物組織，若顯色完成后有沉淀產生，將樣本稀釋后再測定，在計算公式中乘以稀釋倍數。
顯色完成后立即進行測定。
上海牧榮生物科技有限公司
國內試劑耗材經銷代理。
國外試劑的訂購?？商峁W美實驗室品牌的采購方案。
提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。
進出口貨物代理服務。
公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。
質量保證，所有產品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。公司整合國際與國內資源，加強網絡建設，提高公司內部運作效率，為客戶提供方便、快捷的服務。
公司突出創新思維，提高工作效能，減低運作成本，為客戶提供優惠的價格。
維生素B6測試盒
產品咨詢
掃一掃，關注微信
當前位置：
